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cinvestav

Curso de Purificacion de Proteínas

Curso de Purificacion de Proteínas

Curso de Purificacion de Proteínas

Curso de Purificacion de Proteínas

Curso de Purificacion de Proteínas

Curso teorico-practico de purificacion de proteinas recombinantes del 26 al 30 de Septiembre


El grupo de bioquímica estructural del Langebio-Cinvestav realizara un curso teórico-práctico del 26 al 30 de Septiembre, sobre principios de purificación de proteínas recombinantes. El curso se encuentra dirigido a investigadores, estudiantes y al sector industrial que no tienen experiencia previa en expresión y purificación de proteínas. El curso tiene un cupo máximo de 15 personas dado que se desea que todos los participantes tengan experiencia directa y realicen sus prácticas. El curso incluye memorias. La duración del curso es de 40 horas, y será del lunes 26 al viernes 30 de septiembre en el Laboratorio de Bioquímica Estructural de Langebio-Cinvestav, en Irapuato. La cuota de recuperación del curso es de 5,000 pesos (más IVA en caso de necesitar factura).


A) MARCO TEÓRICO

I.- INTRODUCCIÓN

II.- SISTEMAS DE EXPRESIÓN HETERÓLOGA DE PROTEÍNAS

1.- TEORÍA

2.- SISTEMAS DE EXPRESIÓN HETERÓLOGA DE PROTEÍNAS BAJO LA TRANSCRIPCIÓN DE LA T7 RNA POLIMERASA

III.- SISTEMAS DE REPLICACIÓN DE ENSAMBLADOS PROTEICOS

IV.- SISTEMA DE PURIFICACIÓN BASADOS EN EL CONCEPTO DE “ETIQUETAS” O “TAGS”.

1.- ETIQUETA DE HISTIDINAS EN EL SISTEMA PET19 Y PET28

2.- ETIQUETA DE HISTIDINAS EN EL SISTEMA PCOLD

3.- ETIQUETA DE GST EN EL PLASMIDO PGEX 6P

4.- ETIQUETA DE MBP-HISTIDINAS EN PCRI

V SISTEMAS PARA EXPRESAR PROTEÍNAS EN ALTO RENDIMIENTO (HIGH-THROUGHPUT) EN BACTERIA USADOS EN BIOLOGÍA ESTRUCTURAL

VI PROBLEMAS DE E. COLI COMO SISTEMA DE EXPRESIÓN Y CÓMO SOLUCIONAR SUS LIMITACIONES

1.- USO DE CODONES

2.- USO DE CHAPERONAS

3.- FORMACIÓN CORRECTA DE PUENTES DISULFURO

VII G-BLOCKS COMO ALTERNATIVAS A LOS GENES SINTÉTICOS.


B) PROTOCOLOS DE PRÁCTICAS

I.- CREACIÓN DE STOCKS DE GLICEROL PARA ALMACENAMIENTO

II.- PROTOCOLO DE PREPARACIÓN DE CÉLULAS QUIMIO-COMPETENTES

III.- PROTOCOLO DE TRANSFORMACIÓN BACTERIANA: PLÁSMIDO GFP EN BL21 START

IV GENES SINTÉTICOS A PARTIR DE G-BLOCKS

V PROTOCOLO DE LIGACIÓN DE DNA

VI ESTRATEGIAS DE LISADO EN LA PURIFACIÓN DE PROTEÍNAS: CON TIOREDOXINA

VII.- PURIFICACIÓN DE LA PROTEÍNA VERDE FLUORESCENTE (GFP) POR IMAC

VIII DETERMINACIÓN DE DÍMERO MONÓMERO POR FILTRACIÓN EN GEL: TVTIM Y MONO TIM

IX USO DE PROTEASAS PARA ELIMINAR LOS TRACTOS (TVTIM)

X PURIFICACIÓN DE TAQ DNA POLIMERASA

XI TÉCNICA DE WESTERN BLOT

A) ANTI HISTIDINAS

B) ANTI TVTIM


Informes favor de contactar a la Ing. Corina Díaz (corina.diaz@cinvestav.mx) o al M.C. Pedro Jiménez (pedro.jimenez@cinvestav.mx), teléfono 461663000 (ext. 3067),

Langebio-cinvestav, km. 9.6 libramiento norte carretera Irapuato-león, 36821, Irapuato, Guanajuato


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